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akoyabio空間分辨,多重免疫熒光的全面解決方案

 更新時(shí)間:2020-10-12 點(diǎn)擊量:4470

Akoya Biosciences是Akoya Biosciences,Inc.(一家特拉華州公司)的注冊(cè)商標(biāo),而Spatial Biology Company是Akoya Biosciences,Inc.的商標(biāo)。 

akoyabio空間分辨,多重免疫熒光的全面解決方案

表征組織微環(huán)境的復(fù)雜性是理解驅(qū)動(dòng)疾病以及治療反應(yīng)的分子和細(xì)胞機(jī)制的關(guān)鍵要素。

浸潤(rùn)的免疫細(xì)胞和細(xì)胞基質(zhì)重塑之間的空間關(guān)系作用被廣泛認(rèn)為是定義組織異質(zhì)性的關(guān)鍵成分。CODEX系統(tǒng)使研究人員能夠以單細(xì)胞分辨率對(duì)組織樣品中的40多種蛋白質(zhì)標(biāo)記物成像。高度復(fù)用的成像技術(shù)可以研究不同的細(xì)胞表型,以及它們?nèi)绾卧谠幌嗷プ饔靡杂绊懠膊〉牟±砗瓦M(jìn)展。

CODEX Vornoi圖

 

CODEX技術(shù)

CODEX(通過(guò)indEXing進(jìn)行共檢測(cè))技術(shù)使用與專有Akoya條形碼偶聯(lián)的抗體,該條形碼由*的寡核苷酸序列組成。CODEX分析法使用染料標(biāo)記的Reporter靶向特定條形碼,以進(jìn)行高度特異性的檢測(cè)。

用CODEX抗體板對(duì)組織樣品進(jìn)行單步染色,然后Reporters通過(guò)成像和去除的迭代循環(huán)與互補(bǔ)條形碼結(jié)合。循環(huán)由CODEX流體力學(xué)儀器*自動(dòng)化。

靈活

為新鮮的冷凍或FFPE組織設(shè)計(jì)定制面板

樣品友好

可以對(duì)樣本重新成像以進(jìn)行感興趣區(qū)域(ROI)分析

可擴(kuò)展

以單細(xì)胞分辨率在單個(gè)組織樣本中成像40+個(gè)標(biāo)記

全面

包括試劑和軟件分析套件

CODEX復(fù)用成像示例

CODEX解決方案與許多組織類型和格式兼容。

乳癌組織用36重CODEX面板染色

 

人類乳腺FFPE組織被36重面板染色

  • 鈣粘蛋白
  • KRT19
  • KRT17
  • 肌動(dòng)蛋白
  • Ki67
  • CD31
  • DAPI

用28重CODEX面板染色的肺癌組織

 

肺癌FFPE組織被28重面板染色

  • 泛細(xì)胞角蛋白
  • CD8
  • Ki67
  • PD-L1
  • PD-1
  • CD68

 

人體皮膚新鮮的冷凍組織沾有26層面板

  • 泛細(xì)胞角蛋白
  • CD138
  • CD49f
  • CD45
  • CD34
  • Podoplanin
  • CD31

 

固定人PBMC并用26重面板染色

  • Ki67
  • CD45
  • CD2
  • CD31
  • CD63
  • CD45
  • CD7

 

腎細(xì)胞癌FFPE組織用15重面板染色

  • Ki67
  • CD8
  • CD4
  • Podoplanin
  • SMA
  • CD20
  • CD31

實(shí)驗(yàn)工作流程

01

弄臟

使用CODEX抗體面板準(zhǔn)備和染色組織只需一步即可,從而減少了周轉(zhuǎn)時(shí)間并保持了樣品完整性。

02

圖片

全自動(dòng)CODEX儀器和配套顯微鏡在您的組織中對(duì)40多個(gè)標(biāo)記圖像進(jìn)行成像。用戶可以將目標(biāo)分辨率降至20倍的單細(xì)胞分辨率,將目標(biāo)分辨率降至40倍的亞細(xì)胞分辨率。

03

分析

使用全面的CODEX軟件套件處理,分析和可視化圖像。用戶可以訪問(wèn)可視化工具,如用于細(xì)胞表型的門控和聚類。用戶還可以導(dǎo)出文件以在第三方軟件中使用。

醫(yī)學(xué)博士安德拉斯·阿·赫茲(Andras A Heczey)

丹·L·鄧肯綜合癌癥中心兒科腫瘤學(xué)助理教授

貝勒醫(yī)學(xué)院

輸液后活檢非常珍貴……借助CODEX,我們的目標(biāo)是從組織的小樣本中獲取多的數(shù)據(jù),以盡可能多地了解腫瘤的微環(huán)境。

Garry Nolan博士

Rachford和Carlota A. Harris微生物學(xué)和免疫學(xué)系教授

斯坦福大學(xué),Akoya Biosciences聯(lián)合創(chuàng)始人

CODEX的商業(yè)發(fā)布是我實(shí)驗(yàn)室的一個(gè)里程碑,也是生物醫(yī)學(xué)科學(xué)的一個(gè)令人興奮的機(jī)會(huì)。同時(shí)經(jīng)濟(jì)地分析完整組織上數(shù)十種或更多種蛋白質(zhì)標(biāo)記的能力將從根本上改變我們對(duì)細(xì)胞相互作用和疾病生物學(xué)的理解。

實(shí)例探究

范德比爾特糖尿病中心的Powers&Brissova研究小組使用CODEX來(lái)研究胰島微環(huán)境。

 

斯坦福大學(xué)的細(xì)胞科學(xué)成像設(shè)施(CSIF)通過(guò)CODEX系統(tǒng)上的多重成像項(xiàng)目擴(kuò)展了其核心實(shí)驗(yàn)室服務(wù)。

 

賓夕法尼亞大學(xué)的研究人員開發(fā)了一種方法,可以將單細(xì)胞CITE-seq數(shù)據(jù)映射到CODEX復(fù)用IHC圖像,以進(jìn)行空間單細(xì)胞多組學(xué)研究。

 

CODEX分析試劑和抗體

CODEX分析法通過(guò)迭代成像循環(huán)靶向抗體組的子集,從而克服了傳統(tǒng)的多重免疫熒光技術(shù)的挑戰(zhàn),從而在單個(gè)組織切片中揭示了40多種生物標(biāo)志物。

我們提供了完整的解決方案,其中包括針對(duì)CODEX系統(tǒng)進(jìn)行了優(yōu)化和驗(yàn)證的抗體和試劑。經(jīng)驗(yàn)證和庫(kù)存的抗體可用于不同類型的組織:小鼠新鮮冷凍,人新鮮冷凍和人FFPE。用戶可以使用Akoya的定制偶聯(lián)試劑盒靈活地創(chuàng)建由市售的,經(jīng)Akoya驗(yàn)證的抗體或標(biāo)有CODEX條形碼的克隆組成的面板。

試劑盒和試劑

用于組織染色,自定義綴合和執(zhí)行CODEX實(shí)驗(yàn)的緩沖液和試劑

CODEX抗體

CODEX共軛抗體,用于構(gòu)建抗體面板

CODEX條碼

修飾寡核苷酸,易于偶聯(lián)定制CODEX抗體

CODEX記者

熒光團(tuán)偶聯(lián)的寡核苷酸,用于CODEX抗體的可視化

 

試劑盒和試劑

CODEX分析需要專門配制的試劑和緩沖液,以使用CODEX抗體對(duì)組織染色并進(jìn)行迭代成像循環(huán)。對(duì)于每個(gè)成像周期,將三個(gè)帶有特定光譜染料的CODEX Reporter應(yīng)用于染色的組織,以可視化相應(yīng)的CODEX抗體。該CODEX儀器適用輕柔洗滌步驟去除CODEX記者無(wú)任何化學(xué)修飾,隨后施加下一組記者的想象下一組CODEX抗體。

目錄 #

名稱

尺寸

700000110X CODEX緩沖區(qū)10個(gè)反應(yīng)
7000002CODEX檢測(cè)試劑10個(gè)反應(yīng)
7000003核染色10個(gè)反應(yīng)
7000008CODEX染色套件10個(gè)反應(yīng)
7000009CODEX偶聯(lián)試劑盒10個(gè)反應(yīng)
7000010CODEX墊片v210個(gè)墊片
232107CODEX存儲(chǔ)緩沖區(qū)120毫升
7000005蓋玻片138
700000696孔板10
700000796孔板密封10
7000013CODEX蓋玻片儲(chǔ)物盒1盒

 

CODEX抗體

CODEX抗體是單獨(dú)提供的,可以混合使用并與設(shè)計(jì)面板匹配,以同時(shí)分析多達(dá)40多種生物標(biāo)志物。

Akoya提供經(jīng)過(guò)充分測(cè)試的CODEX抗體和一系列補(bǔ)充抗體。

 

CODEX ®盤點(diǎn)抗體

CODEX清單抗體由Akoya提供,并已通過(guò)完整的CODEX抗體驗(yàn)證過(guò)程和制造質(zhì)量控制。我們庫(kù)存的抗體也得到了我們現(xiàn)場(chǎng)支持團(tuán)隊(duì)的全面支持。

 

 

CODEX抗體已在多種類型的人類FFPE組織中進(jìn)行了測(cè)試。這些CODEX抗體與不同的CODEX條形碼(BX000)結(jié)合。每個(gè)試劑盒包含一管CODEX抗體和一管相應(yīng)的染料標(biāo)記的Reporter(RX000),在標(biāo)準(zhǔn)染色條件下有足夠的容量用于25 CODEX運(yùn)行(或測(cè)試)。推薦用于FFPE組織的染料是Atto 550,Cy5和Alexa Fluor™750。

目錄 #

名稱

尺寸

4450036b-Catenin1-BX020(12F7)-Atto 550-RX02025項(xiàng)測(cè)試
4450030CD3e-BX045(EP449E)—Cy5-RX04525項(xiàng)測(cè)試
4350018CD4-BX003(EPR6855)—Cy5-RX00325項(xiàng)測(cè)試
4250012CD8-BX026(C8 / 144B)-Atto 550-RX02625項(xiàng)測(cè)試
4350020CD11c-BX024(118 / A5)—Cy5-RX02425項(xiàng)測(cè)試
4150018CD20-BX007(L26)— Alexa Fluor™488-RX00725項(xiàng)測(cè)試
4450018CD20-BX007(L26)— Alexa Fluor™750-RX00725項(xiàng)測(cè)試
4450027CD21-BX032(EP3093)—阿托550-RX03225項(xiàng)測(cè)試
4150017CD31-BX001(EP3095)— Alexa Fluor™488-RX00125項(xiàng)測(cè)試
4450017CD31-BX001(EP3095)— Alexa Fluor™750-RX00125項(xiàng)測(cè)試
4250002CD44-BX005(IM7)-阿托550-RX00525項(xiàng)測(cè)試
4250023CD45RO-BX017(UCHL1)-Atto 550-RX01725項(xiàng)測(cè)試
4350019CD68-BX015(KP1)—Cy5-RX01525項(xiàng)測(cè)試
4350001CD107a-BX006(H4A3)—Cy5-RX00625項(xiàng)測(cè)試
4250021E-cadherin-BX014(4A2C7)-Atto 550-RX01425項(xiàng)測(cè)試
4350021組蛋白H3磷酸酯(Ser28)-BX030(HTA28)-Cy5-RX03025項(xiàng)測(cè)試
4450029HLA-DR-BX033(EPR3692)—Cy5-RX03325項(xiàng)測(cè)試
4450031角蛋白14-BX002(聚19053)—阿托550-RX00225項(xiàng)測(cè)試
4250019Ki67-BX047(B56)-Atto 550-RX04725項(xiàng)測(cè)試
4450032LIF-BX006(M1506B09)—Cy5-RX00625項(xiàng)測(cè)試
4450034Mac2 / Galectin-3-BX035(M3 / 38)-Atto 550-RX03525項(xiàng)測(cè)試
4150020泛細(xì)胞角蛋白BX019(AE-1 / AE-3)-Alexa Fluor™488-RX01925項(xiàng)測(cè)試
4450020泛細(xì)胞角蛋白BX019(AE-1 / AE-3)-Alexa Fluor™750-RX01925項(xiàng)測(cè)試
4250004Podoplanin-BX023(NC-08)-Atto 550-RX02325項(xiàng)測(cè)試
4450033TFAM-BX029(18G102B2E11)-Atto 550-RX02925項(xiàng)測(cè)試

已經(jīng)使用扁桃體組織測(cè)試了用于人類新鮮冷凍組織的CODEX抗體。這些CODEX抗體與不同的CODEX條形碼(BX000)結(jié)合。每個(gè)試劑盒包含一管CODEX抗體和一管相應(yīng)的染料標(biāo)記的Reporter(RX000),在標(biāo)準(zhǔn)染色條件下有足夠的容量用于25 CODEX運(yùn)行(或測(cè)試)。推薦用于人類新鮮冷凍組織的染料是Atto 550,Cy5和Alexa Fluor™488。

目錄#

名稱

尺寸

4250005CD2-BX002(RPA-2.10)-Atto 550-RX00225項(xiàng)測(cè)試
4350008CD3-BX015(UCHT1)—Cy5-RX01525項(xiàng)測(cè)試
4350010CD4-BX021(SK3)—Cy5-RX02125項(xiàng)測(cè)試
4150004CD8-BX004(SK1)—Alexa Fluor™488-RX00425項(xiàng)測(cè)試
4450004CD8-BX004(SK1)— Alexa Fluor™750-RX00425項(xiàng)測(cè)試
4350012CD11c-BX027(S-HCL-3)—Cy5-RX02725項(xiàng)測(cè)試
4350003CD19-BX003(HIB19)—Cy5-RX00325項(xiàng)測(cè)試
4150009CD21-BX013(Bu32)-Alexa Fluor™488-RX01325項(xiàng)測(cè)試
4450009CD21-BX013(Bu32)-Alexa Fluor™750-RX01325項(xiàng)測(cè)試
4250009CD31-BX032(WM59)—阿托550-RX03225項(xiàng)測(cè)試
4250020CD34-BX035(561)-阿托550-RX03525項(xiàng)測(cè)試
4150007CD38-BX007(HB-7)-Alexa Fluor™488-RX00725項(xiàng)測(cè)試
4450007CD38-BX007(HB-7)-Alexa Fluor™750-RX00725項(xiàng)測(cè)試
4150003CD45-BX001(HI30)— Alexa Fluor™488-RX00125項(xiàng)測(cè)試
4450003CD45-BX001(HI30)— Alexa Fluor™750-RX00125項(xiàng)測(cè)試
4250023CD45RO-BX017(UCHL1)-Atto 550-RX01725項(xiàng)測(cè)試
4350007CD49f-BX033(GoH3)—Cy5-RX03325項(xiàng)測(cè)試
4250022CD69-BX041(FN50)-阿托550-RX04125項(xiàng)測(cè)試
4150021CD90-BX022(5E10)-Alexa Fluor™488-RX02225項(xiàng)測(cè)試
4450021CD90-BX022(5E10)-Alexa Fluor™750-RX02225項(xiàng)測(cè)試
4250008CD104-BX005(58XB4)-Atto 550-RX00525項(xiàng)測(cè)試
4150008CD138-BX010(MI15)-Alexa Fluor™488-RX01025項(xiàng)測(cè)試
4450008CD138-BX010(MI15)— Alexa Fluor™750-RX01025項(xiàng)測(cè)試
4250013CD278-BX017(C398.4A)-Atto 550-RX01725項(xiàng)測(cè)試
4250010CD279-BX014(EH12.2H7)-Atto 550-RX01425項(xiàng)測(cè)試
4250006HLA-DR-BX026(L243)—阿托550-RX02625項(xiàng)測(cè)試
4250019Ki67-BX047(B56)-Atto 550-RX04725項(xiàng)測(cè)試
4150020泛細(xì)胞角蛋白BX019(AE-1 / AE-3)-Alexa Fluor™488-RX01925項(xiàng)測(cè)試
4450020泛細(xì)胞角蛋白BX019(AE-1 / AE-3)-Alexa Fluor™750-RX01925項(xiàng)測(cè)試
4250004Podoplanin-BX023(NC-08)-Atto 550-RX02325項(xiàng)測(cè)試

 

已使用脾臟組織測(cè)試了用于小鼠新鮮冷凍組織的CODEX抗體。這些CODEX抗體與不同的CODEX條形碼(BX000)結(jié)合。每個(gè)試劑盒包含一管CODEX抗體和一管相應(yīng)的染料標(biāo)記的Reporter(RX000),在標(biāo)準(zhǔn)染色條件下有足夠的容量用于25 CODEX運(yùn)行(或測(cè)試)。推薦用于小鼠新鮮冷凍組織的染料是Atto 550,Cy5和Alexa Fluor™488。

目錄#

名稱

尺寸

4350014CD3-BX021(17A2)—Cy5-RX02125項(xiàng)測(cè)試
4250016CD4-BX026(RM4-5)—阿托550-RX02625項(xiàng)測(cè)試
4250007CD5-BX017(53-7.3)-Atto 550-RX01725項(xiàng)測(cè)試
4250017CD8a-BX029(53-6.7)-Atto 550-RX02925項(xiàng)測(cè)試
4150015CD11b-BX025(M1 / 70)—Alexa Fluor™488-RX02525項(xiàng)測(cè)試
4450015CD11b-BX025(M1 / 70)-Alexa Fluor™750-RX02525項(xiàng)測(cè)試
4350013CD11c-BX030(N418)—Cy5-RX03025項(xiàng)測(cè)試
4250014CD19-BX020(6D5)-Atto 550-RX02025項(xiàng)測(cè)試
4250015CD21 / 35-BX023(7E9)-Atto 550-RX02325項(xiàng)測(cè)試
4150014CD24-BX022(M1 / 69)—Alexa Fluor™488-RX02225項(xiàng)測(cè)試
4450014CD24-BX022(M1 / 69)-Alexa Fluor™750-RX02225項(xiàng)測(cè)試
4250001CD31-BX002(MEC13.3)-Atto 550-RX00225項(xiàng)測(cè)試
4150013CD38-BX019(90)— Alexa Fluor™488-RX01925項(xiàng)測(cè)試
4450013CD38-BX019(90)-Alexa Fluor™750-RX01925項(xiàng)測(cè)試
4250002CD44-BX005(IM7)-阿托550-RX00525項(xiàng)測(cè)試
4150002CD45-BX007(30-F11)— Alexa Fluor™488-RX00725項(xiàng)測(cè)試
4450002CD45-BX007(30-F11)— Alexa Fluor™750-RX00725項(xiàng)測(cè)試
4150006CD45R / B220-BX010(Ra3-6B2)-Alexa Fluor™488-RX01025項(xiàng)測(cè)試
4450006CD45R / B220-BX010(Ra3-6B2)-Alexa Fluor™750-RX01025項(xiàng)測(cè)試
4350007CD49f-BX033(GoH3)—Cy5-RX03325項(xiàng)測(cè)試
4350016CD71-BX027(RI7217)—Cy5-RX02725項(xiàng)測(cè)試
4450001CD90.2-BX001(30-H12)-Alexa Fluor™750-RX00125項(xiàng)測(cè)試
4150001CD90.2-BX001(30-H12)-Alexa Fluor™488-RX00125項(xiàng)測(cè)試
4350005CD169-BX015(3D6.112)—Cy5-RX01525項(xiàng)測(cè)試
4150012IgD-BX016(11-26c.2a)-Alexa Fluor™488-RX01625項(xiàng)測(cè)試
4450012IgD-BX016(11-26c.2a)-Alexa Fluor™750-RX01625項(xiàng)測(cè)試
4150011IgM-BX013(RMM-1)-Alexa Fluor™488-RX01325項(xiàng)測(cè)試
4450011IgM-BX013(RMM-1)-Alexa Fluor™750-RX01325項(xiàng)測(cè)試
4250019Ki67-BX047(B56)-Atto 550-RX04725項(xiàng)測(cè)試
4350015Ly6g-BX024(1A8)—Cy5-RX02425項(xiàng)測(cè)試
4250003MHC II-BX014(M5 / 114.15.2)-Atto 550-RX01425項(xiàng)測(cè)試
4350006TCRb-BX003(H57-597)—Cy5-RX00325項(xiàng)測(cè)試
4150005Ter119-BX004(TER-119)-Alexa Fluor™488-RX00425項(xiàng)測(cè)試
4450005Ter119-BX004(TER-119)-Alexa Fluor™750-RX00425項(xiàng)測(cè)試

CODEX ®屏蔽抗體

Akoya并未列出或提供CODEX篩選的抗體,但包括一系列已純化并成功與CODEX Barcodes結(jié)合并在次級(jí)淋巴組織中顯示陽(yáng)性染色信號(hào)的克隆。這些克隆可從其他抗體供應(yīng)商處商購(gòu)獲得,但需要終用戶偶聯(lián)。CODEX條形碼和相關(guān)的共軛協(xié)議可通過(guò)Akoya獲得。

CODEX ®社區(qū)抗體

CODEX用戶群在不斷增長(zhǎng),我們鼓勵(lì)跨客戶站點(diǎn)的協(xié)作,以共享他們經(jīng)過(guò)CODEX測(cè)試的克隆和協(xié)議的列表。這些CODEX社區(qū)抗體雖然證明與CODEX儀器兼容,但不會(huì)通過(guò)Akoya出售。終用戶需要共軛。CODEX條形碼和相關(guān)的共軛協(xié)議可通過(guò)Akoya獲得。我們正在繼續(xù)擴(kuò)大名單。

 

CODEX ®抗體的自定義面板設(shè)計(jì)

Akoya的CODEX系統(tǒng)為用戶提供了靈活性,可以使用自定義偶聯(lián)試劑盒創(chuàng)建由Akoya驗(yàn)證的抗體或標(biāo)有CODEX Barcodes的克隆組成的面板。用戶可以使用CODEX偶聯(lián)試劑盒和各個(gè)CODEX條形碼從第三方抗體供應(yīng)商處穩(wěn)健地制備克隆。

 

CODEX條碼

CODEX條形碼與CODEX偶聯(lián)試劑盒一起使用,可用于定制抗體面板設(shè)計(jì)。每個(gè)試劑盒均包含一管凍干條形碼,用于單個(gè)結(jié)合反應(yīng);兩管Reporters,用于優(yōu)化CODEX抗體滴定和CODEX運(yùn)行。對(duì)于每個(gè)條形碼,都有足夠的體積用于50 µg抗體偶聯(lián),根據(jù)產(chǎn)量和滴度,可以提供足夠的材料用于10至50個(gè)染色。

 

 

 

 

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