??產品概述
化學名:線性聚乙烯亞胺,線性PEI,聚乙烯亞胺,線性,MW 40000,轉染級、線性聚乙烯亞胺(分子量40000)
訂貨號: 78pei40000
規格:100mg/500mg/5g
品牌:BIOHUB
CAS:49553-93-7
分子量:40,000(~22,000自由基)
溶于:水
不溶于:常用有機溶劑(乙醇,丙酮,四氫呋口南)
外觀:白色至灰白色自由流動的固體
處理:手套和通風櫥
儲存:在室溫下避光干燥儲存
介紹:
1.78PEI MAX 40K轉染試劑(在游離堿中也稱為PEI 22K)是一種功能強大,值得信賴且經濟實惠的瞬時轉染試劑。在HEK293和CHO大多數表達系統中,PEI MAX都能提供穩定的高表達(96孔板至100L生物反應器)。現在每年有更多的研究人員和公司來使用PEI MAX進行細胞轉染,因為相對于大多數轉染試劑而言 PEI MAX既能等到穩定的高表達又能使轉染成本降低少40%。
2.78PEI MAX 40K比更PEI 25K易于使用,并且比PEI 25K有更高的轉染效率,通常PEI 25K轉染過程通常需要幾個小時才能完成準備,而PEI MAX 40K可在兩小時內完成整個轉染過程。另外,PEI 25K含有4-11%的殘留丙酰基,這可能阻礙聚合物主鏈與DNA的有效結合,而PEI MAX 40K的丙酰基易脫落,意味著PEI MAX每批產品的性能更加穩定。
??產品配置方法
1. 儲存液配制(1 mg/mL)
-材料:78PEI40000粉末、超純水、1N NaOH、0.1 μm濾膜
-步驟:
① 取1g粉末溶于900 mL超純水,磁力攪拌至溶解;
② 滴加1N NaOH調節pH至6.9-7.1(若超限則用1N HCl回調);
③ 定容至1L,0.1 μm濾膜過濾除菌;
④ 分裝后4℃保存,液體有效期6個月,凍干粉有效期1年。
2. 工作液配制
- 按1 μg DNA : 1-5 μL 78PEI40000儲存液的比例稀釋(推薦初始比例1:3);
- 使用無血清培養基(如Opti-MEM)稀釋DNA和PEI,室溫靜置10-25分鐘形成復合物。
??轉染操作流程
(一)貼壁細胞轉染
1.細胞接種:轉染前24小時接種細胞,密度達70%-80%匯合度,更換為含5%血清的培養基;
2.復合物孵育:將DNA-PEI復合物逐滴加入培養皿,輕柔渦旋后孵育4-6小時;
3.換液與檢測:更換新鮮培養基,7小時后可檢測基因表達,24小時后傳代并添加篩選藥物。
(二)懸浮細胞轉染
1.細胞準備:調整細胞密度至1×10? cells/mL,搖床培養2-4小時;
2.復合物添加:將DNA-PEI復合物直接滴加至搖瓶,持續振蕩培養24-72小時;
3.擴增優化:轉染24小時后可稀釋細胞(1:2-1:5)以提高蛋白產量。
?78PEI MAX 40K轉染試劑關鍵注意事項
1.溶解要求:
- 必須充分溶解,未溶解顆粒會導致轉染效率下降;
- 建議使用NEST 5 mL/14 mL離心管處理大體積溶液。
2.pH控制:
- 初始溶解時pH需精確調節至6.9-7.1,過高或過低均影響復合物形成。
3.細胞狀態:
- 推薦使用對數生長期細胞,避免消化過度損傷細胞膜。
4.毒性控制:
- 高密度細胞(>90%匯合度)需降低PEI用量(推薦比例1:1)。
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貨號 | 品名 | 規格 |
78pei40000 | 線性聚乙烯亞胺 分子量40000 | 100mg |
78pei40000 | 線性聚乙烯亞胺 分子量40000 | 1g |
78pei40000 | 線性聚乙烯亞胺 分子量40000 | 5g |
(注:本文內容基于品牌公開資料及行業常規信息整理,具體以品牌信息文檔為準。)